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Isabel Otero est une actrice française issue d’une famille d’artistes. Fille des peintres Antonio Otero et Clotilde Vautier, elle est aussi la sœur de la réalisatrice Mariana Otero. Après avoir perdu sa mère très jeune, des suites d’un avortement clandestin, elle se forme au Théâtre national de Strasbourg pendant trois ans. En 1985, elle est remarquée au Festival d’Avignon et débute au cinéma avec Derborence, sélectionné à Cannes.

Elle joue dans des films indépendants comme L’Amant magnifique avec Hippolyte Girardot, père de sa fille, l’actrice Ana Girardot, née en 1988. Isabel se tourne ensuite vers la télévision, où elle se fait connaître avec La Crim’ (2001) et Diane, femme flic (2003-2010). Elle continue d’alterner théâtre et téléfilms, comme Meurtres en Béarn (2023). En 2019, elle s’installe au Costa Rica, où elle mène une vie plus écologique, tout en restant proche de sa fille et de ses petits-enfants.